Sales: 021-88224007
0

شمارش و ارزیابی قدرت بقاء یک سلول

سرفصل ها

[postlist]

شمارش و ارزيابي قدرت بقای سلولي( viability)

براي انجام هر آزمايش كشت سلولي مي‌بايست از تعداد سلول­ها آگاه باشيم. روش­هاي مختلفي براي شمارش سلول وجود دارد.

سلول­ها به دو روش مستقيم و غير مستقيم مورد شمارش قرار مي‌گيرند:

­­الف)­ روش مستقيم شمارش سلولي شامل:­­­­

  • شمارش سلول با لام نئوبار (هموسيتومتر)
  • شمارش هستة سلول با هموسيتومتر
  • شمارش هسته در حامل­هاي كوچك داراي منافذ ريز (Microprous carriors)
  • شمارش سلول با استفاده از دستگاه پارتيکل کانتر (Particle counter)
  • تعيين غلظت تيرة سلولي توسط مانيتور کردن تودة زيستی (biomass monitoring)
  • شمارش سلول توسط پروب فلورسانس
  • شمارش سلول با تحليل­کردن تصوير کشت سلولی ( Image analysis)

 شمارش سلول توسط هموسيتومتر :

در آزمايشگاه­هاي كوچك براي شمارش سلول از لام­هاي هموسيتومتر نئوبار استفاده مي­­­شود. این نوع لام در اصل براي شمارش گلبول­­­هاي قرمز و سفيد طراحي شده است. اين لام دارای خط­کشی­هايی با فواصل منظم و نيز ديواره­های جانبی بلندتری نسبت به اتاقک شمارش (Chamber) می باشد(شکل 2ـ1). هنگام پر كردن اتاقك شمارش(Chamber)، سلول­ها بطور تصادفي در اتاقك مذكور پخش می­شوند، بنابراین هر چه تعداد سلول­هاي شمرده­شده بيشتر باشد،دقت و صحت شمارش بيشتر خواهد بود.

براي رقيق كردن سلول ها در هنگام شمارش از محلول تريپان بلو4/. درصد استفاده می­شود. که به وسيلة آن سلول­هاي مرده آبي مي­شوند و می­توان آن­ها را از سلول­هاي زنده كه رنگ نمي­گيرند به راحتي تشخيص داد.

شکل 2-1- لام نئوبار (هموسيتومر)
شکل 2-1- لام نئوبار (هموسيتومر)